Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7CRISPR激活质粒(h): sc-416614-ACT

CHRNA7 编码烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的 α7 亚基。该受体为同源五聚体的配体门控阳离子通道，可在胆碱能信号刺激下介导快速的 Ca²⁺ 内流。在神经元和免疫细胞中，α7 nAChR 的活性会影响膜兴奋性以及钙依赖性的信号级联反应，从而塑造突触可塑性、神经递质释放，并调控与胆碱能抗炎通路相关的转录程序。由 CHRNA7 调控的钙信号可与 MAPK/ERK、JAK/STAT 以及 NF-κB 相关过程发生交互，进而影响细胞因子产生和细胞应激反应。CHRNA7 的遗传变异及其表达改变与神经精神和神经发育相关表型有关；胆碱能信号失衡也常在炎症与神经退行性变等研究背景中被关注。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CHRNA7的表达。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CHRNA7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CHRNA7转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CHRNA7位点，并能够研究内源性位点上依赖于Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CHRNA7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。