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Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 5/CHRNA5双切口酶质粒(h) | sc-401702-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 5/CHRNA5双切口酶质粒(h2) | sc-401702-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CHRNA5 编码神经元型烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)的 α5 辅助亚基,可与其他 α、β 亚基共同组装,调控配体门控阳离子通道的开启/关闭特性、Ca²⁺ 通透性以及受体去敏化。通过胆碱能信号传导,含 α5 的 nAChR 影响细胞膜兴奋性与神经递质释放,并与下游钙依赖性通路及突触可塑性程序相联。CHRNA5 的遗传变异与表达改变与尼古丁依赖和吸烟相关表型有关,也被用于研究与神经精神特征相关的机制,以及与吸烟暴露相关的气道上皮生物学。作为调节性亚基,CHRNA5 为解析"受体组成如何微调胆碱能环路功能及刺激依赖的转录反应"提供了一个便于操作的切入点。
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 5/CHRNA5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CHRNA5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHRNA5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CHRNA5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CHRNA5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。