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Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 4/CHRNA4双切口酶质粒(h) | sc-401605-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 4/CHRNA4双切口酶质粒(h2) | sc-401605-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CHRNA4 编码神经元型烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)的 α4 亚基。该受体为五聚体配体门控阳离子通道,常与 β2 亚基共同组装,形成高亲和力的 α4β2 受体。乙酰胆碱或尼古丁与受体结合后,受体介导 Na⁺ 与 Ca²⁺ 内流,从而调控膜兴奋性、突触传递以及胆碱能环路中与活动相关的可塑性。CHRNA4 依赖的信号传导与钙依赖性通路及神经递质释放程序相互交织,共同塑造与注意、觉醒和奖赏相关的神经网络功能。CHRNA4 的遗传与功能扰动已被认为与多种神经精神与神经系统表型相关,因此它是研究胆碱能信号与受体生物学机制的重要靶点。
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 4/CHRNA4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CHRNA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHRNA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CHRNA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CHRNA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。