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NGAL双切口酶质粒(h) | sc-401838-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NGAL双切口酶质粒(h2) | sc-401838-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LCN2 编码中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)。NGAL 是一种分泌型脂质运载蛋白,可结合与铁载体(siderophore)相关的铁,并调控铁的转运、抗微生物防御以及上皮细胞的应激反应。NGAL 参与先天免疫信号传导与炎症重塑,并通过与 MMP9 等互作伙伴的相互作用,连接到趋化、细胞因子网络以及细胞外基质动态等通路。在人体组织中,LCN2/NGAL 表达异常常与代谢性炎症、肾脏与心血管损伤应答以及肿瘤—基质通讯相关,因此可作为应激适应程序的有用读出指标。这些特征为研究铁依赖性的氧化应激、上皮—免疫串扰以及微环境调控提供了机制层面的支持。
NGAL 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LCN2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LCN2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LCN2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LCN2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。