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NF90双切口酶质粒(h) | sc-402626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NF90双切口酶质粒(h2) | sc-402626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ILF3 编码 NF90,这是一种双链 RNA 结合蛋白,通过调控 mRNA 的稳定性、剪接、核输出与翻译等过程参与转录后基因调控,且常与 NF45 及其他核糖核蛋白复合体伙伴协同作用。NF90 可通过影响干扰素相关转录本及 RNA 代谢通路,参与先天性抗病毒应答与应激适应程序;同时也能通过选择性调控与生长相关的 mRNA 影响细胞周期控制。借助其与转录及 RNA 加工机器的相互作用,NF90 有助于协调与增殖、分化和细胞应激信号相关的基因表达程序。ILF3/NF90 的失调与肿瘤生物学和炎症表型相关情境中的 RNA 稳态异常有关,因此是研究 RNA 驱动调控机制的一个有价值节点。
NF90 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ILF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ILF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ILF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ILF3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。