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Neu1双切口酶质粒(h) | sc-401488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Neu1双切口酶质粒(h2) | sc-401488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEU1 编码神经氨酸苷酶 1(Neu1),这是一种溶酶体唾液酸苷酶,能够从糖蛋白和糖脂上去除末端唾液酸,从而促进糖缀合物的周转并维持溶酶体功能。Neu1 在由保护蛋白/组织蛋白酶 A(cathepsin A)和 β-半乳糖苷酶组成的多酶复合体中发挥作用,将去唾液酸化与更广泛的溶酶体分解代谢过程及糖链重塑相耦联。通过调控细胞表面唾液酸化状态,NEU1 会影响受体转运、内吞作用以及依赖糖蛋白成熟的免疫相关信号事件。NEU1 活性异常与溶酶体贮积性病理以及炎症与代谢表型改变有关,因此在研究依赖溶酶体的稳态机制时具有重要意义。
Neu1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NEU1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NEU1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NEU1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NEU1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。