Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
neogenin Antibody (G-7): sc-514872. Western blot analysis of neogenin expression in Ca Ski whole cell lysate. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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neogenin双切口酶质粒(h): sc-401204-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- neogenin 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- neogenin双切酶质粒（h）和neogenin双切酶质粒（h2）编码针对NEO1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：neogenin: sc-514872，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
neogenin双切口酶质粒(h) | sc-401204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
neogenin双切口酶质粒(h2) | sc-401204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 NEO1 基因编码 neogenin，它是一种免疫球蛋白超家族的跨膜导向受体，可与 netrin 和排斥性导向分子（repulsive guidance molecules，RGM）结合，从而协调轴突导航、神经元迁移以及组织形态发生。Neogenin 信号与细胞骨架重塑和黏附通路相互衔接，并可通过受体串话及依赖情境的方式调控细胞存活与分化，从而影响发育程序。除神经系统外，NEO1 还参与上皮结构组织以及血管和骨骼发育，将导向线索的梯度信息与细胞极性运动和细胞—细胞相互作用联系起来。NEO1 表达异常或通路失衡与神经发育相关表型及肿瘤生物学有关，因此在导向信号机制与细胞状态调控的研究中具有重要意义。
neogenin 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NEO1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NEO1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NEO1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NEO1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。