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NEIL1双切口酶质粒(h) | sc-403778-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NEIL1双切口酶质粒(h2) | sc-403778-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NEIL1 编码 endonuclease VIII-like 1,是一种 DNA 糖基化酶/AP 裂解酶,能够通过识别并切除氧化损伤碱基(如甲酰胺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇)来启动碱基切除修复(BER)。NEIL1 在细胞核基因组中发挥作用,据报道可定位于复制叉,在 S 期支持基因组稳定性,并协调修复过程与 DNA 复制及染色质动态之间的配合。通过与 BER 相关因子及后续修复合成步骤的相互作用,NEIL1 有助于限制由活性氧和内源性 DNA 损伤引发的突变积累与复制压力。在研究中,NEIL1 活性或表达的改变与一些与致癌、神经退行性变以及代谢功能障碍相关的表型有关,体现了氧化性 DNA 损伤处理在人类疾病生物学中的重要性。
NEIL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NEIL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NEIL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NEIL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NEIL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。