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NDUFB5双切口酶质粒(m) | sc-425783-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Ndufb5 编码 NDUFB5,它是线粒体呼吸链复合体 I(NADH:泛醌氧化还原酶)的一个辅助亚基,支持 NADH 向泛醌的高效电子传递,并参与氧化磷酸化过程。复合体 I 的正确组装与稳定性有助于维持线粒体膜电位、ATP 生成以及氧化还原稳态,从而使 NDUFB5 的功能与细胞能量代谢及活性氧(ROS)调控相关联。在小鼠模型中,扰动复合体 I 的组分常用于研究生物能量压力应答中的线粒体功能障碍、代谢适应以及细胞死亡通路。作为由细胞核编码的复合体 I 因子,NDUFB5 与线粒体疾病机制研究以及氧化磷酸化受损相关的更广泛表型密切相关。
NDUFB5 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ndufb5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ndufb5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ndufb5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ndufb5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。