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NDRG3双切口酶质粒(m) | sc-424349-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NDRG3双切口酶质粒(m2) | sc-424349-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ndrg3 基因编码 NDRG3 蛋白,属于 NDRG 家族成员,参与细胞应激适应、代谢调控以及分化程序。研究表明,NDRG3 与缺氧相关信号及乳酸响应通路有关,可影响细胞存活、增殖和转录输出。在许多情境下,NDRG3 的活性与调控线粒体代谢、氧化还原平衡以及发育相关基因表达的过程相互交织。文献中还指出,NDRG3 相关网络的失调与生长调控异常及疾病相关表型有关,因此可将其作为通路与作用机制研究中的一个功能节点。
NDRG3 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ndrg3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ndrg3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ndrg3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ndrg3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。