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NAT-10双切口酶质粒(h) | sc-406713-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
NAT10 编码 NAT-10,这是一种定位于核仁/细胞质的 N-乙酰转移酶,参与 RNA 和蛋白质的乙酰化过程,其中包括对 mRNA 上 N4-乙酰胞苷(ac4C)的调控,从而影响转录本稳定性与翻译效率。NAT-10 还参与核糖体生物发生、核仁稳态,以及与细胞周期相关的过程(如 DNA 损伤应答与复制压力信号传导),将依赖乙酰化的基因表达调控与细胞生长程序相整合。文献报道显示,NAT10 活性或表达的改变与增殖表型、基因组不稳定性以及多种疾病背景下观察到的 RNA 代谢紊乱有关,因而可作为研究应激适应与蛋白稳态(proteostasis)的关键机制节点。因此,NAT10 常被用于研究人类细胞中连接 RNA 修饰、染色质组织与类衰老程序的相关通路。
NAT-10 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NAT10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NAT10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NAT10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NAT10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。