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Nanog双切口酶质粒(h) | sc-418033-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nanog双切口酶质粒(h2) | sc-418033-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NANOG 编码 Nanog,这是一种同源盒(homeobox)转录因子,通过与 OCT4/POU5F1 和 SOX2 协同协调转录网络,在维持人类多能性与自我更新方面起核心作用。Nanog 通过调控染色质状态以及与多能性相关的基因表达程序来影响细胞命运决定,并与多种信号输入相互联结,例如 TGF-β/SMAD、WNT/β-catenin 和 FGF/ERK 通路。NANOG 表达失调与异常分化、表观遗传不稳定,以及在发育障碍和多种癌症中观察到的干细胞样转录状态相关。因此,NANOG 被广泛用作多能干细胞、细胞重编程以及肿瘤细胞可塑性的标志物和功能调控因子进行研究。
Nanog 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NANOG 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NANOG内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NANOG的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NANOG基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。