非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
肌红蛋白抗体（6）：sc-101520。Western blot分析未处理的HeLa（A）、化学处理的HeLa（B）、未处理的HCT-116（C）和化学处理的HCT-116（D）全细胞裂解液中肌红蛋白的表达。β-肌动蛋白（C4）：sc-47778用作内参。检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
myoglobin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401370
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- myoglobin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在myoglobin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：myoglobin: sc-393020，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
myoglobin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401370 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
MB 编码肌红蛋白（myoglobin），这是一种含血红素的结合氧蛋白，可促进横纹肌细胞内氧的储存与扩散，在氧需求波动时支持有氧代谢。通过缓冲氧的可用性，肌红蛋白会影响线粒体氧化磷酸化、氧化还原稳态，以及对缺氧和活性氮/氧物种的应答。MB 的表达或功能改变已在肌病、缺血相关的肌肉损伤，以及肌细胞更广泛的代谢适应等背景下得到研究。在肿瘤学和心血管生物学中，与肌红蛋白相关的氧处理及氧化应激通路也常被用来探究细胞在低氧条件下维持适应性与存活能力的决定因素。
myoglobin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MB基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MB基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MB开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使myoglobin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建MB缺失的细胞模型，用于myoglobin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 myoglobin 功能至关重要的 MB 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 MB 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 myoglobin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 myoglobin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MB 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 myoglobin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 myoglobin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MB同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MB靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。