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MYH9双切口酶质粒(h) | sc-401182-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MYH9双切口酶质粒(h2) | sc-401182-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MYH9 编码非肌肉肌球蛋白 IIA(non-muscle myosin IIA),这是一种依赖肌动蛋白的马达蛋白,可产生收缩力并维持细胞骨架组织。它通过调控肌动蛋白-肌球蛋白(actomyosin)动力学,参与细胞黏附、迁移、机械信号转导、胞质分裂,以及上皮细胞和血小板形态维持等过程。MYH9 的活性与 Rho GTPase/ROCK 信号通路及黏着斑相关通路相互衔接,这些通路共同协调应力纤维的组装与细胞皮层张力的维持。MYH9 的失调或突变与遗传性 MYH9 相关疾病有关,该类疾病以巨大血小板减少为特征,并可伴随不同程度的非造血系统表现,因此 MYH9 也是研究细胞骨架疾病机制的常用靶点。
MYH9 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MYH9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MYH9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MYH9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MYH9基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。