非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
MuRF1 抗体 (C-11): sc-398608. 小鼠心脏 (A), 人类骨骼肌 (B) 和小鼠骨骼肌 (C) 组织提取物中 MuRF1 表达的荧光西部印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断. 所用检测试剂: m-IgG1 BP-CFL 555: sc-533662.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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MuRF1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400797
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MuRF1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在MuRF1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MuRF1: sc-398608，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MuRF1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400797 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
TRIM63 编码肌肉特异性的 E3 泛素连接酶 MuRF1。MuRF1 是一种 RING 指蛋白，定位于肌节结构，促进收缩蛋白及调控蛋白的泛素依赖性周转。MuRF1 在泛素–蛋白酶体系统中发挥作用，并与自噬及应激反应信号协同，在营养缺乏、去神经支配以及炎症刺激条件下推动肌原纤维的重塑。其转录与翻译后调控与 FOXO 驱动的萎缩相关基因（atrogene）程序、胰岛素/IGF-1–AKT 信号以及与 NF-κB 相关的分解代谢通路相互交织。TRIM63 活性失调与骨骼肌萎缩表型和肌肉稳态改变相关，因此是研究蛋白质稳态、代谢以及肌肉消耗机制的重要节点。
MuRF1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TRIM63基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TRIM63基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TRIM63开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使MuRF1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TRIM63缺失的细胞模型，用于MuRF1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 MuRF1 功能至关重要的 TRIM63 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TRIM63 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 MuRF1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 MuRF1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TRIM63 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 MuRF1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 MuRF1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TRIM63同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TRIM63靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。