非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
MTAP 抗体 (42-T): sc-100782. 未转染 293T: sc-117752 (A), 小鼠 MTAP 转染 293T: sc-125650 (B) 和 NIH/3T3 (C) 全细胞裂解液中 MTAP 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
MTAP双切口酶质粒(m): sc-426257-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MTAP 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MTAP双切酶质粒（m）和MTAP双切酶质粒（m2）编码针对Mtap的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MTAP: sc-100782，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MTAP双切口酶质粒(m) | sc-426257-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MTAP双切口酶质粒(m2) | sc-426257-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Mtap 基因编码甲基硫腺苷磷酸化酶（methylthioadenosine phosphorylase，MTAP），这是蛋氨酸回收通路中的关键酶，负责将 5′-甲基硫腺苷转化为腺嘌呤和 5-甲基硫核糖-1-磷酸，从而把多胺代谢与嘌呤稳态及甲基供体稳态联系起来。MTAP 活性有助于维持核苷酸平衡、甲基化能力以及与氧化还原相关的代谢适应性，并与一碳代谢及 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）依赖的过程相整合。MTAP 表达改变或缺失会通过影响腺嘌呤库以及对甲基化敏感的信号传导，重塑细胞代谢状态，并影响与增殖相关的程序。在生物医学研究中，Mtap 常用于探究其在哺乳动物细胞与组织中对代谢脆弱性、表观遗传调控和应激反应的影响。
MTAP 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Mtap 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mtap内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Mtap的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Mtap基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。