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MRP2双切口酶质粒(h) | sc-400601-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MRP2双切口酶质粒(h2) | sc-400601-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABCC2 编码人类 ATP 结合盒(ABC)转运体 MRP2(ABCC2),这是一种位于细胞顶端膜的外排泵,可将谷胱甘肽、葡萄糖醛酸和硫酸结合物以及多种外源性化合物跨极化上皮外排。MRP2 通过将 ATP 水解与肝细胞胆小管膜侧的转运相耦联,支持解毒与胆汁形成,并在肠道和肾脏的屏障功能中发挥作用。通过调控细胞内对代谢物和药物的暴露水平,ABCC2 的活性会影响药代动力学和细胞应激反应,并与氧化应激、结合代谢以及炎症信号调控等通路发生交叉。ABCC2 的遗传或功能受损与 Dubin–Johnson 综合征等结合胆红素升高表型相关,并因其在药物处置及多药耐药机制中的作用而被广泛研究。
MRP2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ABCC2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABCC2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ABCC2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ABCC2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。