Date published: 2026-7-21

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MPST双切口酶质粒(h): sc-401643-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • MPST 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • MPST双切酶质粒(h)和MPST双切酶质粒(h2)编码针对MPST的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:MPST: sc-376168,通过WB, IF或者IHC分析
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    MPST双切口酶质粒(h)

    sc-401643-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    MPST(3-巯基丙酮酸硫转移酶)是一种定位于线粒体和胞质的硫转移酶,可催化过硫化物(persulfide)转移反应,利用半胱氨酸来源的底物促进内源性硫化氢和多硫化物的生成。MPST 通过调控细胞氧化还原稳态和蛋白质过硫化修饰(persulfidation),影响氧化应激反应、线粒体生物能量学以及含硫氨基酸代谢。MPST 活性异常与活性氧(ROS)处理失衡和代谢重塑有关,因此在神经退行性变、心血管应激反应以及炎症相关信号转导等研究中具有重要意义。MPST 的功能也常在铁死亡(ferroptosis)敏感性和巯基依赖的解毒通路背景下进行考察,因为硫转移反应可调节细胞对脂质过氧化的易感性。

    MPST 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MPST 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MPST内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MPST的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MPST基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。