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mPRε慢病毒激活颗粒(m2) | sc-429117-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠Paqr9基因编码膜孕激素受体ε(mPRε),属于PAQR家族的七次跨膜蛋白,被认为参与发生在质膜上的快速、非基因组型孕激素信号传导。mPRε可能通过类似GPCR的方式调控第二信使级联反应,包括对cAMP水平及细胞内钙离子动态变化的调节,从而影响与类固醇激素反应性相关的细胞信号程序。Paqr9的表达与神经内分泌及生殖生理过程有关,而孕激素相关信号的异常也与生育力研究、应激轴调控以及激素依赖性肿瘤生物学等方向密切相关。在小鼠模型中对Paqr9进行基因编辑,有助于机制性解析由膜起始的类固醇通路、其与核孕激素受体信号之间的受体串扰,以及在特定组织或细胞类型中由此引发的下游转录与代谢适应性变化。
mPRε 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Paqr9 表达。
mPRε 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Paqr9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性mPRε表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Paqr9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。