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Mox1双切口酶质粒(m) | sc-433531-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mox1双切口酶质粒(m2) | sc-433531-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Nox1 编码 NADPH 氧化酶同工酶 NOX1(亦称 Mox1)。NOX1 是一种与膜相关的酶,可产生活性氧(ROS),并塑造依赖氧化还原的信号传导。由 NOX1 产生的氧化剂可调控与增殖、迁移、细胞骨架重塑以及炎症相关转录程序有关的通路,包括 MAPK 和 NF-κB 信号,从而影响上皮细胞与血管细胞的生物学功能。在实验模型中,NOX1 活性改变常与氧化应激表型以及宿主防御和屏障功能的变化相关。这些特性使 Nox1 成为解析 ROS 调控的信号转导以及氧化还原对基因表达调控的有用靶点。
Mox1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Nox1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nox1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Nox1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Nox1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。