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MOB2CRISPR激活质粒(h) | sc-413424-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 MOB2(MOB kinase activator 2)编码一种保守的适配蛋白,可与 NDR1/2(STK38/STK38L)家族激酶结合,并在 Hippo 相关信号网络中帮助调控其激活状态。通过这些相互作用,MOB2 参与调节细胞周期进程、细胞骨架组织、细胞极性以及应激反应性信号传导,从而共同影响细胞增殖与迁移。NDR/Hippo 轴各组分的失调常与生长控制改变和基因组稳定性受损相关,因此 MOB2 是研究癌症生物学及其他组织稳态失衡疾病中通路连接关系的重要节点。MOB2 也为在人体细胞模型中研究激酶依赖的转录程序与磷酸化信号动态提供了一个机制切入点。
MOB2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MOB2的表达。
MOB2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的MOB2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于MOB2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性MOB2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的MOB2位点,并能够研究内源性位点上依赖于MOB2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MOB2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟MOB2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。