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MOB1BCRISPR激活质粒(h) | sc-416280-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
MOB1BCRISPR激活质粒(h2) | sc-416280-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
MOB1B(MOB kinase activator 1B)编码 Hippo 信号通路中 LATS1/2 激酶的保守共激活因子,支持调控 YAP/TAZ 活性的磷酸化级联反应,从而影响转录程序以及细胞接触依赖性的生长控制。通过调节 Hippo 通路,MOB1B 参与细胞周期进程、细胞凋亡以及组织稳态的维持。包括 MOB 家族调控因子在内的 Hippo 组分发生扰动,与增殖与迁移表型的改变相关;这些表型常在致癌信号传导与上皮完整性研究背景下被重点关注。因此,MOB1B 也与研究其与 MAPK、PI3K-AKT 及细胞骨架重塑网络之间的通路串话密切相关,而这些网络共同影响细胞命运决定。
MOB1B CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MOB1B的表达。
MOB1B CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的MOB1B基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于MOB1B转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性MOB1B表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的MOB1B位点,并能够研究内源性位点上依赖于MOB1B的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MOB1B表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟MOB1B通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。