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MMP9双切口酶质粒(m) | sc-421679-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
基质金属蛋白酶9(MMP9)由小鼠 Mmp9 基因编码,是一种分泌型、锌依赖性的内肽酶,可降解细胞外基质成分,并对多种生物活性分子进行加工处理,从而调控组织重塑。MMP9 的活性与调节白细胞迁移、细胞因子与趋化因子梯度、血管生成以及伤口修复等通路相互交织,因此常在炎症信号传导与细胞外基质更新的研究背景下被重点关注。在肿瘤微环境及慢性炎症过程中,Mmp9 表达的改变可影响基底膜完整性、免疫细胞浸润以及血管通透性。MMP9 的失调与小鼠癌症进展、关节炎、神经炎症和纤维化重塑等模型相关,因此也是研究基质驱动表型机制时的常用靶点。
MMP9 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mmp9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mmp9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mmp9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mmp9基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。