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MMP-13双切口酶质粒(h) | sc-400626-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MMP-13双切口酶质粒(h2) | sc-400626-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MMP13 编码基质金属蛋白酶-13(MMP-13),这是一种分泌型、锌依赖性的内肽酶,在组织重塑过程中降解纤维状胶原以及其他细胞外基质底物。其活性受前肽激活、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)以及来自细胞因子和生长因子通路(如 MAPK 和 NF-κB)的信号输入调控,这些信号共同协调炎症与重塑程序。MMP-13 的异常表达会促进细胞外基质周转、改变细胞–基质信号传导,并导致与骨关节炎、类风湿关节炎、纤维化以及肿瘤微环境重塑相关的侵袭性表型。作为反映并驱动基质动态变化的指标与效应因子,MMP-13 被广泛用于研究胶原分解代谢、软骨细胞生物学以及基质(间质)–上皮相互作用。
MMP-13 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MMP13 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MMP13内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MMP13的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MMP13基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。