Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MLH1 Antibody (B-12): sc-271978. Western blot analysis of MLH1 expression in HeLa nuclear extract (A) and SW480 whole cell lysate (B).
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MLH1双切口酶质粒(h): sc-401276-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MLH1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MLH1双切酶质粒（h）和MLH1双切酶质粒（h2）编码针对MLH1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MLH1: sc-271978，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MLH1双切口酶质粒(h) | sc-401276-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MLH1双切口酶质粒(h2) | sc-401276-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MLH1 编码一种核心的 DNA 错配修复（MMR）蛋白，可与 PMS2 形成异源二聚体，在复制后修复过程中协同发挥 MutLα 内切核酸酶活性。MLH1 通过识别并处理位于 MutS 复合体下游的碱基-碱基错配以及插入/缺失环，帮助维持基因组稳定性，并在 DNA 复制与重组过程中抑制突变负荷。MLH1 功能受损与微卫星不稳定性及 DNA 损伤应答信号的改变密切相关，使该通路与多种组织中的癌症易感性和肿瘤演化相联系。因此，MLH1 被广泛用于研究复制保真度、染色质相关修复以及突变驱动的细胞表型等模型。
MLH1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MLH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MLH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MLH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MLH1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。