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MEK-5双切口酶质粒(h) | sc-401688-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MEK-5双切口酶质粒(h2) | sc-401688-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MAP2K5 编码 MEK-5,这是一种双特异性 MAP 激酶激酶(MAPKK),可优先磷酸化并激活 ERK5(MAPK7),从而调控与细胞增殖、分化、应激适应以及细胞骨架重塑相关的转录程序。MEK-5–ERK5 信号通路整合生长因子与环境刺激等输入,并影响下游因子(如 MEF2 家族转录调控蛋白),塑造细胞存活与迁移等反应。MAP2K5/ERK5 轴的失调与多种情境中的信号转导改变有关,包括肿瘤相关通路重编程、心血管生物学以及炎症信号传递,因此 MAP2K5 是解析通路串扰的一个有用节点。在人源细胞模型中,扰动 MEK-5 活性有助于开展关于 MAPK 网络特异性及平行 MAPK 级联之间代偿性信号的机制研究。
MEK-5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAP2K5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAP2K5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAP2K5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAP2K5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。