Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MEK-1 Antibody (A-8): sc-365800. Western blot analysis of MEK-1 expression in AT3B-1 (A), U-251-MG (B), F9 (C) and EOC 20 (D) whole cell lysates.
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MEK-1双切口酶质粒(m): sc-424031-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MEK-1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MEK-1双切酶质粒（m）和MEK-1双切酶质粒（m2）编码针对Map2k1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MEK-1: sc-6250，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MEK-1双切口酶质粒(m) | sc-424031-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MEK-1双切口酶质粒(m2) | sc-424031-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Map2k1 编码 MEK-1，这是一种双特异性激酶，可磷酸化并激活 ERK1/2，从而通过经典的 MAPK/ERK 级联通路将来自 RAS 和 RAF 的信号向下游传递。该通路整合生长因子与细胞因子输入，通过 ELK1、c-FOS 和 MYC 等下游效应因子调控细胞周期进程、分化、生存以及转录程序。MEK-1 的活性受支架蛋白与反馈调控机制影响，这些机制塑造信号的强度与持续时间，在小鼠模型中支持对发育与组织稳态过程的精确控制。MAP2K1/MEK-1 信号失调被广泛认为与异常增殖和谱系决定相关，使其成为研究致癌信号动态、耐药机制及通路串扰的核心节点。
MEK-1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Map2k1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Map2k1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Map2k1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Map2k1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。