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MDR1/ABCB1双切口酶质粒(h) | sc-400178-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MDR1/ABCB1双切口酶质粒(h2) | sc-400178-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABCB1(MDR1/P-糖蛋白)编码一种 ATP 结合盒(ABC)外排转运蛋白,主要定位于质膜,通过 ATP 水解将多种外源性化合物和内源性代谢物泵出细胞。MDR1/ABCB1 在肠道、肝脏、肾脏以及血脑屏障等器官中参与上皮屏障与组织保护功能,影响细胞内药物处置过程和细胞应激反应。其活性与解毒和药代动力学通路相互交织,包括与核受体信号(如 PXR、CAR)的协同调控,以及调节细胞表面转运体丰度的膜运输过程。ABCB1 的表达或功能失调常在癌症模型的多药耐药表型,以及不同组织间药物反应差异的研究中被重点关注。
MDR1/ABCB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ABCB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABCB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ABCB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ABCB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。