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MDMX双切口酶质粒(h) | sc-417855-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MDMX双切口酶质粒(h2) | sc-417855-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MDM4 编码 MDMX,它是 TP53 肿瘤抑制通路的关键负调控因子,可调节由 p53 介导的转录程序,这些程序控制细胞周期停滞、细胞凋亡以及 DNA 损伤应答。MDMX 可与 p53 结合,并与 MDM2 协同抑制 p53 活性,从而影响检查点信号传导与细胞对压力的耐受性。在多种与癌症相关的情境中,MDM4 表达改变或 MDMX 功能异常与 p53 信号失衡以及基因组监视机制受损有关。因此,MDM4 因其在致癌通路重编程、复制压力应答以及 p53 网络稳健性方面的作用而被广泛研究。
MDMX 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MDM4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MDM4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MDM4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MDM4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。