Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MDH2 Antibody (1G12): sc-293474. Western blot analysis of MDH2 expression in IMR-32 whole cell lysate.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MDH2双切口酶质粒(h): sc-402825-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MDH2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MDH2双切酶质粒（h）和MDH2双切酶质粒（h2）编码针对MDH2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MDH2: sc-293474，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MDH2双切口酶质粒(h) | sc-402825-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MDH2双切口酶质粒(h2) | sc-402825-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MDH2 编码线粒体苹果酸脱氢酶，这是一种 NAD 依赖性酶，催化苹果酸与草酰乙酸之间的可逆转化，从而支持三羧酸（TCA）循环以及线粒体氧化还原稳态。通过参与氧化代谢，MDH2 促进 ATP 生成、维持 NADH/NAD⁺ 平衡，并提供补充反应（anaplerotic）通量，将线粒体功能与更广泛的碳代谢连接起来。MDH2 活性受扰动会改变呼吸能力和代谢信号传导——这些过程常在线粒体疾病、神经退行性变以及肿瘤代谢研究中被重点探究。作为线粒体基质中的核心酶，MDH2 也与研究细胞对缺氧、营养胁迫的代谢适应，以及活性氧（ROS）动态变化密切相关。
MDH2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MDH2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MDH2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MDH2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MDH2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。