MDA5慢病毒激活颗粒(m): sc-427977-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- MDA5 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- MDA5慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 MDA5 慢病毒激活质粒 (m) 和 MDA5 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Ifih1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MDA5慢病毒激活颗粒(m) | sc-427977-LAC | 200 µl | CNY3422.00 | |||
MDA5慢病毒激活颗粒(m2) | sc-427977-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Ifih1 编码黑色素瘤分化相关蛋白 5（MDA5），这是一种位于细胞质的 DExD/H-box RNA 解旋酶，可识别病毒复制过程中产生的长双链 RNA。MDA5 与 RNA 结合后，通过 MAVS 传递信号，激活 TBK1/IKKε 以及下游的 IRF3/IRF7 和 NF-κB 通路程序，从而诱导 I 型干扰素和干扰素刺激基因的表达。该通路塑造先天性抗病毒免疫，并与自噬及炎症小体相关反应发生串扰，同时影响抗原呈递和炎症基调。MDA5 信号失调与异常的干扰素特征及免疫介导的病理过程有关，因此 Ifih1 是在小鼠模型中解析先天免疫激活与炎症相关表型的一个有用关键节点。
MDA5 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ifih1 表达。
MDA5 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Ifih1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性MDA5表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Ifih1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。