非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
MCR 抗体 (4i342)：sc-71554。Western 印迹分析 MCF7 全细胞裂解液中 MCR 的表达。所用检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
MCR双切口酶质粒(h): sc-400672-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MCR 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MCR双切酶质粒（h）和MCR双切酶质粒（h2）编码针对NR3C2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MCR: sc-53000，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MCR双切口酶质粒(h) | sc-400672-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MCR双切口酶质粒(h2) | sc-400672-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NR3C2 编码盐皮质激素受体（MCR），这是一种配体激活型核受体，可结合盐皮质激素和糖皮质激素，从而调控转录程序，控制上皮钠转运、钾稳态、细胞外液容量以及血压调节。激素结合后，MCR 会转位进入细胞核，并通过激素反应元件及与共调节因子的相互作用来调节基因表达，同时与 MAPK 信号以及炎症相关的转录网络发生交叉作用。在肾脏、结肠和心血管组织中，NR3C2 影响由 ENaC/SGK1 驱动的离子转运与细胞应激反应，将受体活性与电解质平衡及组织重塑联系起来。NR3C2 的失调或突变与盐皮质激素信号异常相关的疾病有关，包括失盐表型以及心血管与肾脏生理功能的改变，提示其在内分泌与心肾通路机制研究中具有重要意义。
MCR 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NR3C2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR3C2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NR3C2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NR3C2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。