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MCP-1双切口酶质粒(h) | sc-401046-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MCP-1双切口酶质粒(h2) | sc-401046-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 CCL2 基因编码单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),这是一种分泌型 CC 趋化因子,负责协调单核细胞/巨噬细胞以及其他表达 CCR2 的白细胞向组织应激部位的募集。MCP-1 信号调控白细胞的趋化运动、内皮细胞–白细胞相互作用以及巨噬细胞极化,并与 NF-κB 和 MAPK 相关的炎症转录程序相整合。CCL2/MCP-1 表达失衡与多种慢性炎症微环境有关,包括动脉粥样硬化、代谢性炎症、神经炎症以及肿瘤相关髓系细胞浸润。作为免疫细胞转运中的枢纽趋化因子,CCL2 常被用于建立模型,以研究炎症信号如何塑造组织重塑及疾病相关的免疫表型。
MCP-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CCL2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCL2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CCL2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CCL2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。