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MCM4双切口酶质粒(h) | sc-402451-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MCM4双切口酶质粒(h2) | sc-402451-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MCM4 编码微小染色体维持蛋白(MCM2–7)解旋酶复合体的核心亚基之一。该复合体负责对复制起点进行“许可”,并在 S 期推动 DNA 解旋。MCM4 受 CDK 和 DDK 信号通路调控,参与复制起始与延伸,协调复制叉推进,并在复制压力下维持基因组稳定性。MCM4 功能受扰会打乱 DNA 复制时序并激活 ATR–CHK1 等检查点通路,使其与防止 DNA 损伤累积的保护机制相关联。MCM4 的异常表达或功能缺陷与增殖表型及基因组不稳定有关,这些特征与肿瘤生物学以及遗传性 DNA 复制与修复障碍相关。
MCM4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCM4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCM4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCM4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCM4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。