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Mcl-1双切口酶质粒(h) | sc-400079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mcl-1双切口酶质粒(h2) | sc-400079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCL1 编码抗凋亡的 BCL-2 家族蛋白 Mcl-1。Mcl-1 是线粒体外膜通透化的关键调控因子,可抑制依赖 BAX/BAK 的细胞凋亡并支持细胞存活。Mcl-1 整合来自应激与生长通路的信号,包括 PI3K–AKT、MAPK/ERK 以及整合性应激反应等,其水平受转录调控、快速的蛋白酶体周转和磷酸化动态控制。通过塑造细胞凋亡阈值并维持线粒体稳态,MCL1 影响造血细胞维持、免疫细胞激活,以及对代谢与基因毒性应激的应答。MCL1 表达或稳定性的失调常与癌症生物学中凋亡改变相关,也与神经退行性疾病和炎症环境中与细胞存活相关的表型有关。
Mcl-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。