MC1-R CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421583
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MC1-R CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在MC1-R基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MC1-R CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421583 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Mc1r 编码黑皮质素 1 受体（MC1-R），这是一种 G 蛋白偶联受体，在黑色素细胞中高表达，通过与 Gs 偶联并激活 cAMP/PKA 信号通路来调控色素生成。MC1-R 的激活会通过包括 CREB 及多种黑色素生成酶在内的下游效应因子，影响真黑素（eumelanin）与褐黑素（pheomelanin）合成的平衡，并整合诸如 α-MSH 等激素信号以及刺鼠信号蛋白（agouti signaling protein）的拮抗作用。在小鼠模型中，Mc1r 活性改变会调节毛色表型，并与控制色素细胞氧化应激反应及紫外线诱导损伤处理的通路发生交叉。由于黑皮质素信号与 MAPK 以及调控黑色素细胞分化的转录程序相互衔接，扰动 Mc1r 有助于在皮肤病学研究中探索色素细胞生物学、炎症相关信号串扰，以及基因型到表型的映射关系。
MC1-R CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Mc1r基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Mc1r基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Mc1r开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使MC1-R蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Mc1r缺失的细胞模型，用于MC1-R信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 MC1-R 功能至关重要的 Mc1r 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Mc1r 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 MC1-R CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 MC1-R CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Mc1r 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 MC1-R HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 MC1-R HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Mc1r同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Mc1r靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。