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MBNL2双切口酶质粒(h) | sc-401921-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MBNL2双切口酶质粒(h2) | sc-401921-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MBNL2(muscleblind-like splicing regulator 2,muscleblind 样剪接调控因子 2)是一种 RNA 结合蛋白,可识别 YGCY 基序,从而在发育及组织分化过程中调控可变剪接、mRNA 定位与稳定性。在细胞核内,它协调剪接位点的选择,并参与 RNA 加工网络的构建,从而影响细胞骨架组织、细胞周期进程以及应激适应性转录程序。MBNL2 常在 RNA 重复序列相关毒性与剪接病(spliceopathy)机制的研究中被重点关注,因为 MBNL 家族活性受扰会引发广泛的错误剪接。MBNL2 依赖性的剪接失调已与多种神经肌肉及神经退行性疾病模型相关,使其成为解析 RNA 加工通路的重要靶点。
MBNL2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MBNL2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MBNL2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MBNL2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MBNL2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。