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MBNL1双切口酶质粒(h) | sc-402194-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MBNL1双切口酶质粒(h2) | sc-402194-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MBNL1(muscleblind-like splicing regulator 1,肌盲样剪接调控因子1)编码一种RNA结合蛋白,可识别前体mRNA中的YGCY基序,从而调控可变剪接、mRNA定位及稳定性。它协同执行对肌发生、神经元分化以及维持组织特异性同工型表达至关重要的转录后基因调控程序。MBNL1参与RNA加工及与剪接体相关的通路,并有助于在多种转录本中建立发育过程中的剪接转换。MBNL1的失调或功能性隔离与肌强直营养不良及其他神经肌肉表型中观察到的异常剪接特征密切相关,因此它是研究RNA错误加工机制的重要关键节点。
MBNL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MBNL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MBNL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MBNL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MBNL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。