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MaxiKβ双切口酶质粒(h) | sc-403096-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MaxiKβ双切口酶质粒(h2) | sc-403096-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
KCNMB1 编码大电导、钙和电压激活的钾通道(BK/MaxiK)的 β1 调节亚基。该亚基通过提高表观 Ca²⁺ 敏感性并塑造膜复极过程来调节通道门控。在人体平滑肌及其他兴奋性组织中,MaxiKβ1 将细胞内 Ca²⁺ 信号与钾离子外流耦联,通过对膜电位的反馈调控影响血管张力、气道收缩性以及神经元放电。其调节作用使 KCNMB1 与 Ca²⁺ 依赖性信号传导、机电耦联以及对一氧化氮/cGMP 反应的通路相关联,这些通路共同汇聚于离子通道的调控。BK 通道 β1 功能异常已在血压调控、平滑肌高反应性和兴奋性障碍等研究中受到关注,使 KCNMB1 成为开展离子通道机制研究的有用靶点。
MaxiKβ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KCNMB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KCNMB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KCNMB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KCNMB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。