The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
Max双切口酶质粒(h): sc-400596-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Max 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Max双切酶质粒（h）和Max双切酶质粒（h2）编码针对MAX的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Max: sc-8011，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Max双切口酶质粒(h) | sc-400596-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Max双切口酶质粒(h2) | sc-400596-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 MAX 基因编码 Max 蛋白，这是一种碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）亮氨酸拉链型转录因子，可与 MYC 家族蛋白形成二聚体，从而调控依赖 E-box 的基因表达程序，进而控制细胞生长、代谢、核糖体生物发生以及细胞周期进程。Max 也可与 MXD/MNT 伙伴形成抑制性复合物，对 MYC 驱动的转录激活起到制衡作用，并帮助维持转录稳态。通过这些依赖情境的激活型与抑制型二聚体，MAX 在 MYC/MAX/MAD 网络信号中发挥功能，并与染色质调控相互作用，从而塑造谱系特异性与刺激特异性的转录输出。MAX 活性异常或 MYC–MAX 轴受破坏与增殖失调及致癌性转录状态相关，因此 MAX 常被用于肿瘤生物学、代谢适应与转录调控研究。
Max 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MAX 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAX内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MAX的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MAX基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。