
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Matriptase-2CRISPR激活质粒(h) | sc-410357-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Matriptase-2CRISPR激活质粒(h2) | sc-410357-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
TMPRSS6 编码 matriptase-2(膜丝氨酸蛋白酶-2),这是一种在肝脏中高表达的 II 型跨膜丝氨酸蛋白酶,是全身铁稳态的重要负调控因子。Matriptase-2 通过蛋白水解方式调控血红素连接蛋白(HJV)/BMP‑SMAD 信号轴,从而抑制铁调素(hepcidin)的表达,并进一步影响由铁输出蛋白(ferroportin)介导的铁外排以及转铁蛋白饱和度。借由这一通路,TMPRSS6 将细胞外蛋白水解作用与铁代谢相关基因的转录调控相衔接。TMPRSS6 的遗传或功能失调与由铁调素驱动的“限制性缺铁”表型密切相关,使其成为研究铁调控机制与红细胞生成的重要核心靶点。
Matriptase-2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TMPRSS6的表达。
Matriptase-2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TMPRSS6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TMPRSS6转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Matriptase-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TMPRSS6位点,并能够研究内源性位点上依赖于Matriptase-2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TMPRSS6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Matriptase-2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。