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MATH-1双切口酶质粒(h) | sc-404171-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MATH-1双切口酶质粒(h2) | sc-404171-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATOH1 编码人类的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子 MATH-1。该因子是决定细胞谱系的关键调控因子,能够驱动神经元与感觉细胞的分化程序。MATH-1 整合多种发育信号输入,包括 Notch 以及 Wnt/β-连环蛋白相关的转录网络,从而在神经上皮环境中协调命运承诺、细胞周期退出与成熟过程。ATOH1 的表达或活性失调与多种癌症中的分化状态改变及增殖调控异常有关,并被广泛用于神经发育与感觉器官生物学的模型研究。作为一个转录调控枢纽,ATOH1 常用于解析调控祖细胞维持与终末分化之间平衡的基因调控回路。
MATH-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATOH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATOH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATOH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATOH1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。