Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MARCKS双切口酶质粒(h): sc-400837-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MARCKS 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MARCKS双切酶质粒（h）和MARCKS双切酶质粒（h2）编码针对MARCKS的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MARCKS: sc-100777，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MARCKS双切口酶质粒(h) | sc-400837-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MARCKS双切口酶质粒(h2) | sc-400837-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
肉豆蔻酰化富丙氨酸的 C 激酶底物（myristoylated alanine-rich C kinase substrate，MARCKS）是一种与细胞膜相关、受 PKC 调控的肌动蛋白结合蛋白，可通过可逆磷酸化以及与钙调蛋白结合来协调细胞骨架重塑、膜运输和磷脂酰肌醇信号传导。MARCKS 通过在质膜处“封存—释放”PIP2 来影响调控细胞极性、运动性、内吞与外排的多条通路，并对与 MAPK 及 Rho 家族 GTP 酶相关的下游过程产生影响。MARCKS 的功能常在神经发育与突触可塑性，以及免疫细胞激活与分泌等背景下被研究。在多种癌症模型中，MARCKS 表达或磷酸化失调与细胞迁移和侵袭表型的改变有关；同时也与炎症及神经发育疾病机制相关，提示其作为信号网络中的关键功能节点具有重要意义。
MARCKS 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MARCKS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MARCKS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MARCKS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MARCKS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。