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MALT1CRISPR激活质粒(h) | sc-400791-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
MALT1CRISPR激活质粒(h2) | sc-400791-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 MALT1(黏膜相关淋巴组织淋巴瘤易位蛋白 1)是一种旁半胱天冬酶(paracaspase),在淋巴细胞中作为抗原受体下游的核心信号枢纽发挥作用。它整合来自 CARD11–BCL10–MALT1(CBM)复合体的信号,推动经典 NF-κB 与 MAPK 通路的激活。除支架功能外,MALT1 还可通过其蛋白酶活性切割特定底物,从而精细调控 T 细胞和 B 细胞的活化、细胞因子产生以及生存相关程序。MALT1 信号失调与异常免疫激活相关,并可通过改变 NF-κB 依赖的转录程序参与淋巴系恶性肿瘤的生物学过程。因此,调控 MALT1 的表达有助于解析信号依赖的转录调控、免疫受体通路的连接方式以及情境特异性的炎症基因调控。
MALT1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MALT1的表达。
MALT1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的MALT1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于MALT1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性MALT1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的MALT1位点,并能够研究内源性位点上依赖于MALT1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MALT1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟MALT1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。