Date published: 2026-7-27

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MAL双切口酶质粒(h2): sc-403024-NIC-2

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • MAL 双切口酶质粒(h2)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • MAL双切酶质粒(h2)和MAL双切酶质粒(h22)编码针对MAL的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:MAL: sc-390687,通过WB, IF或者IHC分析
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    MAL双切口酶质粒(h2)

    sc-403024-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    人类MAL基因编码髓鞘与淋巴细胞蛋白,这是一种高度疏水的四跨膜成分,富集于糖脂和胆固醇含量高的膜微域中,可在极性上皮细胞里帮助组织顶端分选与囊泡运输,并在形成髓鞘的细胞中促进蛋白脂质的组织与排列。MAL参与依赖膜筏的转运过程,并影响内吞回收与信号的区室化,因此与上皮极性的维持及特化膜结构域的形成相关。已有研究在多种癌症以及脱髓鞘和免疫细胞功能相关情境中观察到MAL表达异常或表观遗传沉默,使其成为研究谱系分化、膜运输缺陷与肿瘤生物学的有用标志物。对MAL进行基因编辑可支持对膜筏相关转运通路、细胞极性调控,以及在人体模型系统中对增殖、迁移和与髓鞘相关的膜动力学产生的情境特异性影响进行机制性研究。

    MAL 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAL基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。