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MACF1慢病毒激活颗粒(h) | sc-402923-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
微管–肌动蛋白交联因子1(MACF1)是一种体积巨大的 spectraplakin 家族细胞骨架支架蛋白,负责协调微管与 F-肌动蛋白之间的相互作用,从而调控细胞极性、迁移以及细胞内结构组织。在人类细胞中,MACF1 支持黏着斑周转、囊泡与细胞器定位以及细胞骨架重塑等过程,这些过程共同构成上皮形态发生和神经元突起生长的基础。它也与细胞皮层的信号整合相关,包括在 Wnt/β-连环蛋白通路动态以及依赖细胞骨架的转运中的作用。对 MACF1 相关细胞骨架调控失衡的研究涉及神经发育表型、屏障完整性和侵袭性细胞行为等情境,使其成为解析组织结构与细胞运动机制的重要研究对象。
MACF1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MACF1 表达。
MACF1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MACF1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MACF1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MACF1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。