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LYSMD3CRISPR激活质粒(h) | sc-409014-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 LYSMD3 基因编码一种含 LysM 结构域的膜相关蛋白,被认为参与黏膜与上皮界面的先天免疫感知。LysM 基序通常介导与含糖的微生物结构结合,从而使 LYSMD3 与模式识别信号传导以及对髓系细胞和屏障细胞类型炎症反应的调控相关联。此类感知通路的扰动会影响细胞因子程序、上皮防御以及与微生物组的相互作用。因此,在研究炎症信号网络以及先天免疫失调参与致病的相关疾病背景时,LYSMD3 具有重要研究价值。
LYSMD3 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性LYSMD3的表达。
LYSMD3 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的LYSMD3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于LYSMD3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性LYSMD3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的LYSMD3位点,并能够研究内源性位点上依赖于LYSMD3的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在LYSMD3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟LYSMD3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。