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LTRPC7双切口酶质粒(h) | sc-402820-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LTRPC7双切口酶质粒(h2) | sc-402820-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TRPM7(LTRPC7)编码一种双功能离子通道–激酶,可介导 Mg2+ 和 Ca2+ 内流,并将二价阳离子稳态与丝氨酸/苏氨酸磷酸化过程相耦联。TRPM7 的活性会通过与磷脂酰肌醇信号、机械转导以及依赖激酶的下游效应因子调控相关的通路,影响细胞骨架动力学、细胞黏附与迁移,以及膜兴奋性。作为细胞内镁和钙平衡的核心调节因子,TRPM7 已在细胞增殖、应激反应和代谢适应等背景下得到研究。TRPM7 功能或表达的改变与神经系统损伤机制、心血管重塑以及与癌症相关的信号状态有关,支持其作为多种疾病模型中的研究靶点。
LTRPC7 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TRPM7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TRPM7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TRPM7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TRPM7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。