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Lsh双切口酶质粒(h) | sc-402466-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Lsh双切口酶质粒(h2) | sc-402466-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HELLS 编码 Lsh(淋巴组织特异性解旋酶),是一种 SNF2 家族的 ATP 依赖性染色质重塑因子。它通过促进 DNMTs 及其他表观遗传调控因子接触核小体 DNA,支持 DNA 甲基化的维持与异染色质形成。Lsh 还参与复制耦联的染色质组装、对重复序列的转录抑制,并通过影响染色质致密化以及 DNA 修复相关过程来维持基因组稳定性。HELLS 的失调与异常的 DNA 甲基化模式、细胞周期调控改变以及基因组不稳定性表型相关,这些现象在发育障碍和癌症相关的表观遗传重塑研究中均有观察。作为一种核内染色质因子,Lsh 常被用于研究连接表观遗传传递、转座子沉默与复制压力应答的通路。
Lsh 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HELLS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HELLS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HELLS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HELLS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。