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LRP5双切口酶质粒(m) | sc-421465-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Lrp5 编码低密度脂蛋白受体相关蛋白 5(LRP5)。LRP5 是一种单次跨膜的共受体,通过与 Frizzled 受体形成配体诱导的复合物来增强经典的 Wnt/β-连环蛋白信号通路。在小鼠组织中,LRP5 参与成骨细胞活性、骨量调控以及代谢稳态,并可通过 β-连环蛋白依赖的转录影响细胞增殖与分化程序。LRP5 还与 DKK、硬化蛋白(sclerostin)等细胞外调节因子发生交互,在发育与组织重塑过程中协调通路输出。Lrp5 信号失调常被用于建立模型,以研究与骨骼表型及 Wnt 驱动的组织生理变化相关的机制。
LRP5 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Lrp5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Lrp5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Lrp5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Lrp5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。